Anzu va al preescolar amb les seves amigues Koume, la tímida, i Hiiragi, l'excèntrica. Juntes intenten atreure l'atenció de Tsuchida-sensei, qui està clarament enamorat de Yamamoto-sensei, l'encarregada de la classe del costat. El primer dia de classes en l'Hanamaru Kindergarten, Tsuchida-sensei es troba amb Anzu sola al carrer esperant la seva mare, intenta cridar-la però Anzu confon tot l'assumpte pensant que ell intenta lligar-se-la i és així com inicien les seves aventures diàries.
Tsuchida
És l'únic mestre masculí en Hanamaru Kindergarten i va començar a ensenyar a l'escola després de la seva graduació. Al principi no sembla ser molt fiable, però amb el temps, obté la destresa per a ser mestre. Anzu està enamorada d'ell, però ell no li torna l'afecte a ella, ja que Tsuchida només té ulls per la professora Nanako Yamamoto, a qui ell adora, i vol confessar els seus sentiments, però la seva timidesa i el despistada que és ella l'hi impedeix .
Anzu
Estudiant de jardí d'infants a la classe de Tsuchida.esta enamorada d'ell, al punt on vol casar-se, però sempre falla a obtenir la seva atenció. És coneguda per fer accions perilloses, el que fa que molts adults es preocupin, pel que sembla, al final ella renuncia als seus sentiments per Tsuchida per veure-ho feliç i que li confessi el seu amor a Nanako.
Koume
Estudiant de jardí d'infants a la classe de Tsuchida i amiga de Anzu. Ella és molt timida i sensitiva.
Hiiragi
Estudiant de jardí d'infants a la classe de Tsuchida i amiga de Anzu. Ella és superdotada però s'avergonyeix molt fàcilment. El seu pare treballa en un laboratori científic, és coneguda per usar disfresses diferents d'animalets en cada episodi.
Sakura
Mare de Anzu i companya de classe de Tsuchida. Anima Anzu a casar-se amb Tsuchida, ja que ella mateixa es va casar amb el seu mestre d'Art, encara que en realitat ho fa jugant, doncs intenta ajudar a Tsuchida perquè estigui amb la professora Yamamoto.
Yamamoto Sensei
El seu nom és Nanako. És la professora en la llar d'infants a la classe del costat de Tsuchida. És molt tendra, bufona i amable, però extremadament despistada i no es dóna compte quan algú sent afecte per ella, el que li passa a Tsuchida qui està perdudament enamorat d'ella i no pot confessar-li que la vol.